HPV16 E6E7抗原表达模型的建立

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目的用基因重组技术构建pcDNA~E6E7真核表达载体。方法经限制性内切酶和序列分析,用脂质体转染技术将其转入B16细胞,G418稳定筛选后IFA法检测其表达,RT-PCR法检测HPV16E6E7mR2qA的生成,并将转染细胞接种小鼠皮下,观察成瘤情况。结果酶切鉴定证实重组质粒中插入的目的基因片段及载体大小、方向和插入位点均正确,在转染的B16细胞中可见绿色荧光并检测到HPV16E6E7mRNA的生成,接种的转染细胞在小鼠皮下100%成瘤。结论提示B16细胞转染E6E7后其致瘤性与转染空载体组和野生型B1
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