【摘 要】
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目的观察成人脂肪干细胞(ADSCs)的体外多向分化能力。方法从正常成人脂肪组织分离得到ADSCs并体外培养。在ADSCs中分别加入成人脂肪、骨、软骨、肝细胞的体外诱导培养基诱导,
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目的观察成人脂肪干细胞(ADSCs)的体外多向分化能力。方法从正常成人脂肪组织分离得到ADSCs并体外培养。在ADSCs中分别加入成人脂肪、骨、软骨、肝细胞的体外诱导培养基诱导,观察诱导过程中细胞形态的变化,诱导前、诱导1周、诱导2周时采用RT-PCR法观察细胞相应标志物mRNA表达的变化。结果 ADSCs向脂肪细胞诱导2周,细胞内的脂质空泡聚集,小脂滴融合在一起并变大;最后细胞变为单房,并且充满脂质,红油O染色阳性;诱导1周细胞PPARγ、脂蛋白酶和αP2 mRNA表达较诱导前增加;诱导2周细胞PPARγ、脂蛋白酶mRNA表达降低,但αP2 mRNA变化不明显。ADSCs向骨细胞诱导5天,细胞由成纤维形转化为多边形或不规则状。诱导2周单层细胞聚集成块,形成细胞岛状结构,ALP染色阳性,von Kossa染色可见黑色矿化结节;矿化结节形成后细胞向结节移行聚集,促使更多的细胞形成更大的矿化结节;诱导后细胞ALP、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达逐渐增加。ADSCs向软骨细胞诱导1周,细胞呈多边形或类圆形,细胞团向内呈放射状聚集,FITC染色后免疫荧光可见Ⅱ型胶原;诱导1、2周时细胞Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖和SOX9 mRNA表达明显高于诱导前。ADSCs向肝细胞诱导2周时可见部分细胞变成圆形或椭圆形,并随时间顺延呈肝细胞样圆形细胞增多趋势,细胞核居中,圆形且边缘清楚,PAS染色阳性;诱导1、2周时细胞CK18、HNF1α及白蛋白mRNA表达明显高于诱导前。结论成人脂肪组织中分离得到的成人ADSCs可在体外定向分化为脂肪细胞、骨细胞、成骨细胞和肝细胞。
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