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[目的]拟扩增穿孔素(pore fomfing protein,PFP)全序列,构建PFP的原核表达载体,从而建立其原核表达体系,获得高效表达的重组PFP[方法]用淋巴细胞分离液分离肿瘤组织中的淋巴细胞,并抽提RNA,RT—PCR方法获得PFP的全长,并重组到pGEX-4T—1中,用限制性内切酶酶切和DNA测序法进行鉴定,通过Western blotting分析表达产物。[结果]限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实成功获得PFP基因片段,PFP准确克隆人pGEX-4T-1,并未改变渎码框架,在大肠杆菌BL