下调TRAF6基因表达对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及其机制研究

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snowliya
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目的 探讨下调肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖的影响及其机制.方法 采用RT-PCR及Western blot技术检测TRAF6在MM细胞系KM3、U266、RPMI8226细胞及MM原代细胞的表达;构建TRAF6小干扰RNA (siRNA),转染RPMI8226细胞,荧光显微镜观察、RT-PCR和Western blot检测转染效率,CCK-8法测定不同浓度siRNA沉默TRAF6表达后细胞增殖情况,Hoechst33258/碘化丙锭(PI)双染法分析细胞凋亡率;Western blot法观察沉默TRAF6基因表达前后凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX表达情况和下游NF-κB信号通路蛋白的变化.结果 TRAF6 mRNA和蛋白表达水平在MM细胞系和MM原代细胞均明显增高,尤以MM原代细胞为甚.50 nmol/L siRNA转染RPMI8226细胞后TRAF6 mRNA相对表达水平(0.49±0.24)明显低于未转染组(1.87±0.23)及阴性对照转染组(1.74±0.35).siRNA干扰后细胞增殖受抑,且呈剂量依赖性.细胞凋亡率由11.20%上升到51.82%,同时Bcl-2蛋白表达下调、BAX表达升高,NF-κB通路蛋白p-p65、p52的活性下降.结论 TRAF6在骨髓瘤细胞中表达增高,下调TRAF6表达可明显抑制骨髓瘤细胞增殖并诱导其凋亡,其作用可能与影响骨髓瘤细胞的NF-κB经典和旁路途径信号传递有关。

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