大肠杆菌海藻糖合成酶基因的克隆和表达

• 作 者: 戴秀玉 吴大鹏
• 机 构: 中国科学院微生物研究所
• 出 处: 遗传学报
• 发表日期: 2000年2期
• 关键词: OtsBA基因 海藻糖 细胞内克隆 抗逆性 作物育种 otsBA gene trehalose cloning in vivo gene expressi
• 基金项目: 国家科委“九五”攻关项目!96－C03－01－09

利用Ｍｕ转座子细胞内克隆了大肠杆菌海藻糖合成酶ｏｔｓＢＡ基因，克隆频率为１．４５×１０＾－３／Ｋａｎ＾ｒ转导子。经遗传互补、酶切和部分序列分析表明ｏｔｓＢＡ基因位于克隆质粒。亚克隆２．８７ｋｂ ＤＮＡ片段至不同拷贝数表达质粒并分别转化大肠杆菌ｏｔｓＢＡ基因缺失株，转化株恢复在０．５ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ培养基上生长的功能，高渗透压诱导实验表明，转化株能够合成克隆基因产物海藻糖，但合成量不受克隆质粒拷