【摘 要】
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目的 探讨改良大鼠胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)的分离提取,同时探讨脂肪间质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)对活化态PSCs增殖、活化、凋亡的影
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院肝胆胰外科,浙江省,325000
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目的 探讨改良大鼠胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)的分离提取,同时探讨脂肪间质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)对活化态PSCs增殖、活化、凋亡的影响.方法 采用不灌注,直接提取胰腺剪碎消化,Optiprep密度梯度离心法分离大鼠PSCs.建立PSCs与ADSCs的双层培养体系,CCK-8比色法检测ADSCs对PSCs增殖的影响;Western blot检测PSCs α-肌动蛋白(αt-SMA)的表达;流式细胞仪检测ADSCs对PSCs凋亡的影响;检测培养液中细胞因子的含量探讨可能的作用机制.结果 PSCs得率稳定在5×106/鼠以上,纯度为90％ ～95％左右,存活率为92％ ～97％.ADSCs明显抑制PSCs的活化与增殖(F=223.27,P＜0.05;F=52.97,P＜0.05),促进PSCs的凋亡(F =43.62,P＜0.05),ADSCs比PSCs分泌更多的NGF(14.68±0.94比8.31±0.86,t=4.67,P＜0.05),而较少分泌TGF-β1(10.65±0.46比70.47±0.99,t=21.72,均P＜0.01).结论 大鼠ADSCs具有分泌细胞因子抑制PSCs活化增殖,促进凋亡的潜能.
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