La Sota与V4疫苗F蛋白的B细胞表位活性检测与比较

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根据La Sota 和V4疫苗株F蛋白B细胞表位预测的结果,进行了表位区的鉴定和比较.将两疫苗株F基因预测存在差异的表位,根据序列位置邻近合并分成6段表位区,分别对每个毒株的6段表位区进行了亚克隆,并对每个毒株的预测区进行了表达.应用建立的Tricine缓冲体系50 g/L~200 g/L线性梯度聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳对表达情况进行了分析,得到5段多肽的大小分别是P1为8.0 ku,P2为10.8 ku,P4为11.6 ku,P5为13.5 ku,P6为10.5 ku.应用La Sota特异性抗血清,利用Western blotting对表达的各肽段进行了抗原性鉴定.结果表明,P1、P4、P5、P6段呈阳性反应,说明其中含有线性B细胞表位.这4段分别位于F蛋白的1 aa~48 aa,201 aa~274 aa,377 aa~458 aa和469 aa~530 aa,以前发现的中和性表位均不在这4段区域内.而P2段在Western blotting中无抗体反应性,表明它不含线性表位.比较研究发现NDV La Sota与V4株的P4区的B细胞表位活性存在着重要的差异,这种差异可能造成两个毒株的免疫原性差异.
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