猪O型口蹄疫病毒P1／3C基因共表达重组腺病毒的构建与鉴定

• 作 者: 黄毓茂 王声会 焦茂兴
• 机 构: 华南农业大学兽医学院,宜春学院农学院
• 出 处: 畜牧与兽医
• 发表日期: 2008年1期
• 关键词: 口蹄疫 FMDV 重组腺病毒 Foot-and-mouth disease FMDV recombinant adenovirus
• 基金项目: 广东省科技攻关项目（2006B20801003）.

通过PCR和RT—PCR扩增出目的基因，将FMDVP1和3C基因通过IRES串联，构建出重组腺病毒穿梭质粒，在BJ5173细菌中同源重组获得同源重组腺病毒质粒，转化XL1-Gold超级感受态细胞以扩大培养，PacⅠ酶切后转染AD-293细胞，纯化获得了重组腺病毒。该重组腺病毒于AD-293细胞连续传代培养，初步浓缩后TCID50为10^10．71／mL。应用O型口蹄疫病毒阳性血清进行间接荧光抗体试验，病毒感染的AD-293细胞可见清晰荧光，证明该重组腺病毒对目的基因进行了成功的表达，为FMDVP1／3C基