睾丸酮丛毛单胞菌活化因子基因的质粒载体构建及表达

• 作 者: 戴艺民 潘大仁 GuangmingXiong 吴明霞
• 机 构: 福建农林大学作物学院,福建省农业科学院甘蔗研究所,InstituteofToxicologyandPharmacologyforNaturalScientces
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2006年3期
• 关键词: 睾丸酮丛毛单胞菌 活化因子 3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶 基因表达 Comamonas testosteroni activator 3α -hydro
• 基金项目: 福建省科技厅攻关计划重大项目（2003N028）和福建省发改委项目资助致谢：本研究是与德国Kiel大学合作课题中的一部分,德国Kiel大学提供了activator基因等材料,特此表示感谢.

提取睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonas testosteroni）的基因组DNA,利用PCR扩增activator基因,将扩增产物克隆到pKtac1（含强启动子tac）中,构建重组质粒pKtac1-act1和pKtac1-act2.经酶切分析和测序,鉴定出正确的重组质粒pKtac1-act1和pKtac1-act2.将重组质粒转化入大肠杆菌（Eschericbia coli）HB101中,用酶联免疫分析方法测定细菌总蛋白质中的activator表达量;将pAX1（含3α-HSD/CR基因）分别和重组质粒