【摘 要】
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目的:从体内外两方面探讨慈姑多糖(SSP)是否通过激活核因子相关因子2(Nrf2)信号通路实现异烟肼(INH)和利福平(RFP)联用诱导肝损伤的保护作用.方法:将48只雄性BALB/C小鼠分为6组:正常对照组,INH/RFP模型组,水飞蓟素阳性对照组和SSP低、中、高剂量组,每组8只.应用INH与RFP联合灌胃建立肝损伤模型,同时进行SSP灌胃干预30 d后,应用HE染色观察小鼠肝脏损伤情况,并确定SSP最佳给药剂量;免疫组化检测对照组、模型组及SSP最佳剂量组小鼠肝细胞Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-
【机 构】
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北京中医药大学中医学院,北京102488;北京市西城区白纸坊社区卫生服务中心,北京100054;北京中医药大学中药学院,北京102488
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目的:从体内外两方面探讨慈姑多糖(SSP)是否通过激活核因子相关因子2(Nrf2)信号通路实现异烟肼(INH)和利福平(RFP)联用诱导肝损伤的保护作用.方法:将48只雄性BALB/C小鼠分为6组:正常对照组,INH/RFP模型组,水飞蓟素阳性对照组和SSP低、中、高剂量组,每组8只.应用INH与RFP联合灌胃建立肝损伤模型,同时进行SSP灌胃干预30 d后,应用HE染色观察小鼠肝脏损伤情况,并确定SSP最佳给药剂量;免疫组化检测对照组、模型组及SSP最佳剂量组小鼠肝细胞Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)含量;体外实验应用MTT法检测SSP对HepG2细胞的无毒浓度;ELISA法检测HepG2细胞中Nrf2、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、促凋亡蛋白(Bax)、抑制凋亡蛋白(Bcl-2)的浓度;RT-PCR法检测SSP对转染siRNA细胞中Nrf2 mRNA的表达.结果:HE染色结果显示,与模型组比较,SSP给药组肝脏渗出性病变损伤明显减轻,其中SSP高剂量给药组损伤改善最明显;免疫组化结果显示,与模型组比较,SSP组可显著增加肝细胞中Nrf2及HO-1的表达(P＜0.05).在体外ELISA实验中,与对照组比较,模型组HepG2细胞中Nrf2、Bax、Bcl-2浓度升高,Keap1浓度降低;与模型组比较,SSP给药组能显著提高Nrf2活性,并降低Keap1浓度,激活抗凋亡因子Bcl-2活性,降低促凋亡基因Bax的活性(P＜0.05).转染siRNA细胞后,与模型siRNA组比较,SSP siRNA组可显著促进细胞内Nrf2 mRNA含量(P＜0.05).结论:SSP能有效改善INH和RFP联用导致的小鼠渗出性肝损伤情况,并可能通过激活Nrf2信号通路及调节凋亡因子含量,发挥保护作用.
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