渥曼青霉素对大鼠缺血再灌注心肌细胞自噬和凋亡的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shihaiquanhanhan
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目的 观察渥曼青霉素(WT)对大鼠缺血再灌注心肌细胞自噬与凋亡的影响.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组(Sham组,n=12)、心肌缺血再灌注损伤模型组(I/R组,n=12)、I/R+渥曼青霉素处理组(WT组,n=12).采用穿线结扎左冠状动脉前降支30 min制备I/R模型,WT组于缺血30 min后鼠尾静脉注射WT(15 μg/kg).再灌注120 min后采集股动脉血样,检测血清乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶(CK)活性;取心脏标本,采用氯化三苯基四氮唑染色法(TTC)检测每组大鼠相对心肌梗死面积百分比;取缺血心肌标本,采用原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,计算细胞凋亡指数(AI),苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌细胞病理学变化,Western blot法检测各组心肌细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)及凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达.结果 与I/R组比较,WT组血清LDH[(2 356.14±328.46)比(3674.96±409.47) U/L]和CK[(2412.71±334.84)比(3 825.42±433.03) U/L]活性、心肌梗死面积百分比[(39.19±8.34)%比(56.70±9.92)%]及细胞AI[(18.72±3.17)%比(36.58±7.55)%]明显降低(P<0.01).WT组心肌细胞损伤较I/R组轻.与I/R组比较,WT组LC3-Ⅱ(0.45 ±0.18比0.71 ±0.21)、Caspase-3(0.52 ±0.23比0.52±0.23)蛋白相对表达量明显降低(P<0.01).结论 WT干预通过降低心肌细胞自噬活性和细胞凋亡水平,减轻大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤.
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