论文部分内容阅读
[摘要] 目的 观察红花注射液对阿霉素诱导大鼠心肌损伤的保护作用和抗氧化作用。方法 选用阿霉素诱导大鼠心肌损伤模型。SD大鼠60只,随机分为3个组,每组20只,分别为对照组、损伤组、治疗组。对照组:实验第1～9天注射生理盐水,每天3mL/kg,l次/d。治疗组:实验第1～9天注射红花注射液,每天2g/kg,1次/d,第4天注射阿霉素,隔天1次,连用3次,用生理盐水配置成lmg/mL,每次3mg/kg。损伤组:实验1～9天注射生理盐水,每天3mL/kg,1次/d。第4天注射阿霉素,以后隔天1次、连用3次,用生理盐水配置成1mg/mL,每次3mg/kg。实验结束测定血清CK,SOD活性及心肌匀浆MDA含量、AST活性,并进行心肌病理检查。结果 经阿霉素损伤后,血清CK活性及心肌匀浆MDA含量增高,AST活性增高,SOD活性降低,与正常组比较有极显著性差异(P<0.01); 心肌MDA含量降低,CK及AST活性降低,SOD活性升高,与损伤组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论 红花注射液有抗氧化作用和对阿霉素所引起的心脏毒性具有保护作用,为临床寻找有效的阿霉素所致心肌损伤保护药物提供良好的客观依据。
[关键词] 阿霉素;心肌损伤;红花注射液;抗氧化
[中图分类号] R285.5 [中图分类号] A[文章编号] 1673-9701(2009)24-45-02
Protective Effect of Honghua Injection on Myocardium Injury Induced by Adriamycin in Rats
LI XuebinWANG Kai
Nanyang Central Hospital of Henan Province,Henan 473000,China
[Abstract] Objective To observe the protective effect and antioxidative effect of Honghua injection(HHI) on the myocardiam injury induced by adriamycin(ADM) in rats. Methods Sixty SD rats(weighing 200～220g) were randomly divided into three groups. In the control group,normal saline was ip injected at a dose of 3mL/kg once a day for 9 days. The injury group was given ip injection of ADM at a dose of 3mg/kg from the 4th day,once every other day for 3 times and normal saline at a dose of 3 mL/kg once a day for 9 days. The therapy group was given ip injection of ADM at a dose of 3mg/kg from the 4th day,once every other day for 3 times and HHI at a dose of 2g/kg once a day for 9 days.The activity of superoxided lsmutase(SOD), serum creatine phosphokinase activity(CK) and the level of malondialdehyde(MDA) were assayed,and at the same time,the rat myocardial pathomorphism was detected. Results Compared with the injury group,the serum SOD activity was higher(P<0.01),and the serum MDA activity was lower in therapy group(P<0.01). The protection of myocardial pathological damage in therapy group was improved(P<0.01). Conclusion The HHI has protective effect and antioxidative effect on the myocardium injury induced by adriamycin in rats.
[Key Words] Adriamycin;Myocardium injury;Honghua injection;Antioxidative effect
阿霉素(adriamycin,ADM)是蒽环类抗肿瘤药物,具有抗瘤谱广、作用强的特点,临床上广泛用于治疗各种恶性肿瘤。但是,由于阿霉素具有明显的心肌毒性,因而使其临床应用受到限制。对阿霉素所致的心肌损害,目前尚缺乏理想的防治方法。红花注射液(honghua injection,HHI)具有保护心肌、清除自由基、抗脂质过氧化和改善心功能等作用[1,2]。本实验选用ADM诱导大鼠心肌损伤模型,观察HHI的抗氧化作用及心肌保护作用。
1材料与方法
1.1动物
SD大鼠60只,均为雄性,体重200～220g,由郑州大学医学院实验动物所提供。
1.2药品
阿霉素,批号为20060122,浙江海门制药公司产品,溶于生理盐水,冰箱保存备;红花注射液,吉林诺氏制药有限公司生产,批号20060410。
1.3实验方法
实验动物用随机数字表分组编号,分为3个组,每组20只,分别为对照组、损伤组、治疗组。动物模型的制作:对照组:实验第1～9天注射生理盐水,1次/d,每天3mL/kg。治疗组:实验第1～9天注射红花注射液,每天3mL/kg,第4天注射阿霉素,3mg/kg。损伤组:实验1～9天注射生理盐水,1次/d,每天3mL/kg。第4天注射阿霉素,3mg/kg,以后隔天1次,连用3次。药物均腹腔注射,2min注射完。第10天将大鼠断头取血,分离血清,3000 r/min,离心10 min,-20℃以下保存,待测。采血后迅速解剖,取出心脏,甲醛固定,苏木精伊红染色,光镜观察。
1.4检测指标
血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性的测定、心肌肌酸激酶(CK)活性测定、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,严格按说明书进行操作。
1.5心肌病理
计分光镜下心肌损伤病变包括心肌空泡变性,心肌肌原纤维变性或凝固性坏死。按心肌病变范围分为:0分,无损伤;1分,轻度损伤,病变累及范围小于心肌全层的100%;2分,中度损伤,病变累及范围占心肌全层10%～50%;3分,重度损伤,病变累及范围超过心肌全层的50%。
1.6统计学方法
采用统计学软件SPSS13.0对数据进行处理。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用t检验,病理记分比较采用两两秩和检验。P<0.05,有显著差异。
2结果
2.1红花注射液对阿霉素心肌损伤大鼠CK、AST、SOD、MDA的影响
与对照组相比,损伤组AST、CK活性明显升高,而治疗组明显低于损伤组(P<0.01);与对照组相比,损伤组MDA含量明显升高,而治疗组明显低于损伤组(P<0.01);与对照组相比,损伤组SOD活性明显降低,而治疗组明显高于损伤组(P<0.01)。见表1。
3讨论
蒽环类抗癌药物于60年代开始应用于临床,是应用最广泛的抗癌药物之一,因其抗癌谱广、抗瘤活性强,故在肿瘤化疗中获得很高评价[3]。临床上应用的最早的蒽环类化合物为阿霉素,研究表明,阿霉素的浓度、峰值或用药方法分别与症状缓解及肿瘤消退有关。这些研究表明增高起始的血药浓度可提高药物的有效率,而蒽环类药物均可导致急性或者慢性心脏毒性,且阿霉素引起心脏损伤的原因尚未完全清楚,目前认为与氧自由基有关,氧自由基所导致的氧化损伤是阿霉素引起心脏毒性的主要原因,而线粒体呼吸链又是自由基产生的主要部位,故其本身易成为自由基损伤的主要靶点。一般认为,SOD对维护OZ的低水平是必要的,而GSH则对防止体内自由基引起的膜脂质过氧化尤其重要[4]。在体内诱导产生的氧自由基,可逐渐消耗机体内的抗氧化酶,超氧化物歧化酶是体内重要的自由基——超氧自由基的天然清除剂,是免除自由基损伤的主要防御酶[5]使其活性下降,机体抗氧化能力下降,使心肌细胞膜系统的不饱和脂质过氧化,导致心肌损伤。
本实验观察,给大鼠阿霉素造模后,引起心肌自由基代谢紊乱,MDA含量增高,SOD活性下降,心肌病理检查发现心肌细胞变性,肌原纤维变性或凝固性坏死。MDA是脂质过氧化反应终产物,脂质过氧化反应是发生在多聚不饱和脂肪酸上的系列自由基反应。脂质过氧化是氧自由基造成组织细胞损伤和主要途径之一,测定脂质过氧化发生的程度,可作为判断自由基致细胞损伤的指标,证实ADM心脏毒性作用与自由基有关。
红花注射液主要成分为红花黄色素,其主要药理作用为活血通经,祛瘀止痛,有轻度兴奋心脏、降低冠脉阻力、增加冠脉流量、心肌营养性血流量和降低血管外周阻力的作用,抑制氧自由基生成和抗脂质过氧化的作用,能提高血清SOD和过氧化氢酶活性,并能降低脂质过氧化物的含量,可使离体豚鼠心脏的心肌收缩力增强,冠脉流量增加,抑制心肌组织中磷酸肌酸激酶的释放,降低血清磷酸肌酸激酶水平,保护心肌组织超氧化物歧化酶活性,减少MDA生成,防止心肌细胞脂质过氧化及改善脂肪酸代谢,改善心肌代谢,保护心肌细胞[6-8]。
本实验中,红花注射液治疗组显著降低阿霉素所致心肌损伤中AST和CK活性,能提高阿霉素心肌损伤后心肌的SOD活性,显著降低心肌内MDA含量。能够保护阿霉素引起的大鼠心肌多方面损伤。红花注射液对阿霉素所致的心肌损害有明显的改善保护作用和抗氧化作用,为临床应用提供了一定的理论基础。
[参考文献]
[1] 王达理,曾爱萍,南柏松. 红花水提物抗自由基保护心肌细胞的作用[J]. 中国中医基础医学杂志,2001,7(2):35.
[2] 张明霞,李效忠,赵磊,等. 红花抗衰老作用的实验研究[J]. 中草药,2001,32(1):52.
[3] 赵先英,张涛,刘毅敏. 右丙亚胺对蒽环类抗肿瘤抗生素心脏保护作用的研究进展[J]. 癌症,2001,20(4):439.
[4] 陈钢. 自由基与中医中药[M]. 北京:中医文献出版社,1993:53.
[5] 徐从高,张茂宏,扬兴季. 癌-照料学原理和实践[M]. 上卷.第5版.济南:山东科学技术出版社,2001:489.
[6] 汪洋.红花注射液对高血压患者氧自由基及红细胞流变性的影响[J].西北药学杂志,2006,21(3):56.
[7] 李翠芳. 红花注射液对心绞痛患者氧自由基的影响[J]. 现代中西医结合杂志,2005,14(1):55-56.
[8] 宋培光. 红花注射液的临床应用[J]. 安徽医药,2005,9(9):707-708.
(收稿日期:2009-03-17)
[关键词] 阿霉素;心肌损伤;红花注射液;抗氧化
[中图分类号] R285.5 [中图分类号] A[文章编号] 1673-9701(2009)24-45-02
Protective Effect of Honghua Injection on Myocardium Injury Induced by Adriamycin in Rats
LI XuebinWANG Kai
Nanyang Central Hospital of Henan Province,Henan 473000,China
[Abstract] Objective To observe the protective effect and antioxidative effect of Honghua injection(HHI) on the myocardiam injury induced by adriamycin(ADM) in rats. Methods Sixty SD rats(weighing 200～220g) were randomly divided into three groups. In the control group,normal saline was ip injected at a dose of 3mL/kg once a day for 9 days. The injury group was given ip injection of ADM at a dose of 3mg/kg from the 4th day,once every other day for 3 times and normal saline at a dose of 3 mL/kg once a day for 9 days. The therapy group was given ip injection of ADM at a dose of 3mg/kg from the 4th day,once every other day for 3 times and HHI at a dose of 2g/kg once a day for 9 days.The activity of superoxided lsmutase(SOD), serum creatine phosphokinase activity(CK) and the level of malondialdehyde(MDA) were assayed,and at the same time,the rat myocardial pathomorphism was detected. Results Compared with the injury group,the serum SOD activity was higher(P<0.01),and the serum MDA activity was lower in therapy group(P<0.01). The protection of myocardial pathological damage in therapy group was improved(P<0.01). Conclusion The HHI has protective effect and antioxidative effect on the myocardium injury induced by adriamycin in rats.
[Key Words] Adriamycin;Myocardium injury;Honghua injection;Antioxidative effect
阿霉素(adriamycin,ADM)是蒽环类抗肿瘤药物,具有抗瘤谱广、作用强的特点,临床上广泛用于治疗各种恶性肿瘤。但是,由于阿霉素具有明显的心肌毒性,因而使其临床应用受到限制。对阿霉素所致的心肌损害,目前尚缺乏理想的防治方法。红花注射液(honghua injection,HHI)具有保护心肌、清除自由基、抗脂质过氧化和改善心功能等作用[1,2]。本实验选用ADM诱导大鼠心肌损伤模型,观察HHI的抗氧化作用及心肌保护作用。
1材料与方法
1.1动物
SD大鼠60只,均为雄性,体重200～220g,由郑州大学医学院实验动物所提供。
1.2药品
阿霉素,批号为20060122,浙江海门制药公司产品,溶于生理盐水,冰箱保存备;红花注射液,吉林诺氏制药有限公司生产,批号20060410。
1.3实验方法
实验动物用随机数字表分组编号,分为3个组,每组20只,分别为对照组、损伤组、治疗组。动物模型的制作:对照组:实验第1～9天注射生理盐水,1次/d,每天3mL/kg。治疗组:实验第1～9天注射红花注射液,每天3mL/kg,第4天注射阿霉素,3mg/kg。损伤组:实验1～9天注射生理盐水,1次/d,每天3mL/kg。第4天注射阿霉素,3mg/kg,以后隔天1次,连用3次。药物均腹腔注射,2min注射完。第10天将大鼠断头取血,分离血清,3000 r/min,离心10 min,-20℃以下保存,待测。采血后迅速解剖,取出心脏,甲醛固定,苏木精伊红染色,光镜观察。
1.4检测指标
血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性的测定、心肌肌酸激酶(CK)活性测定、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,严格按说明书进行操作。
1.5心肌病理
计分光镜下心肌损伤病变包括心肌空泡变性,心肌肌原纤维变性或凝固性坏死。按心肌病变范围分为:0分,无损伤;1分,轻度损伤,病变累及范围小于心肌全层的100%;2分,中度损伤,病变累及范围占心肌全层10%～50%;3分,重度损伤,病变累及范围超过心肌全层的50%。
1.6统计学方法
采用统计学软件SPSS13.0对数据进行处理。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用t检验,病理记分比较采用两两秩和检验。P<0.05,有显著差异。
2结果
2.1红花注射液对阿霉素心肌损伤大鼠CK、AST、SOD、MDA的影响
与对照组相比,损伤组AST、CK活性明显升高,而治疗组明显低于损伤组(P<0.01);与对照组相比,损伤组MDA含量明显升高,而治疗组明显低于损伤组(P<0.01);与对照组相比,损伤组SOD活性明显降低,而治疗组明显高于损伤组(P<0.01)。见表1。
3讨论
蒽环类抗癌药物于60年代开始应用于临床,是应用最广泛的抗癌药物之一,因其抗癌谱广、抗瘤活性强,故在肿瘤化疗中获得很高评价[3]。临床上应用的最早的蒽环类化合物为阿霉素,研究表明,阿霉素的浓度、峰值或用药方法分别与症状缓解及肿瘤消退有关。这些研究表明增高起始的血药浓度可提高药物的有效率,而蒽环类药物均可导致急性或者慢性心脏毒性,且阿霉素引起心脏损伤的原因尚未完全清楚,目前认为与氧自由基有关,氧自由基所导致的氧化损伤是阿霉素引起心脏毒性的主要原因,而线粒体呼吸链又是自由基产生的主要部位,故其本身易成为自由基损伤的主要靶点。一般认为,SOD对维护OZ的低水平是必要的,而GSH则对防止体内自由基引起的膜脂质过氧化尤其重要[4]。在体内诱导产生的氧自由基,可逐渐消耗机体内的抗氧化酶,超氧化物歧化酶是体内重要的自由基——超氧自由基的天然清除剂,是免除自由基损伤的主要防御酶[5]使其活性下降,机体抗氧化能力下降,使心肌细胞膜系统的不饱和脂质过氧化,导致心肌损伤。
本实验观察,给大鼠阿霉素造模后,引起心肌自由基代谢紊乱,MDA含量增高,SOD活性下降,心肌病理检查发现心肌细胞变性,肌原纤维变性或凝固性坏死。MDA是脂质过氧化反应终产物,脂质过氧化反应是发生在多聚不饱和脂肪酸上的系列自由基反应。脂质过氧化是氧自由基造成组织细胞损伤和主要途径之一,测定脂质过氧化发生的程度,可作为判断自由基致细胞损伤的指标,证实ADM心脏毒性作用与自由基有关。
红花注射液主要成分为红花黄色素,其主要药理作用为活血通经,祛瘀止痛,有轻度兴奋心脏、降低冠脉阻力、增加冠脉流量、心肌营养性血流量和降低血管外周阻力的作用,抑制氧自由基生成和抗脂质过氧化的作用,能提高血清SOD和过氧化氢酶活性,并能降低脂质过氧化物的含量,可使离体豚鼠心脏的心肌收缩力增强,冠脉流量增加,抑制心肌组织中磷酸肌酸激酶的释放,降低血清磷酸肌酸激酶水平,保护心肌组织超氧化物歧化酶活性,减少MDA生成,防止心肌细胞脂质过氧化及改善脂肪酸代谢,改善心肌代谢,保护心肌细胞[6-8]。
本实验中,红花注射液治疗组显著降低阿霉素所致心肌损伤中AST和CK活性,能提高阿霉素心肌损伤后心肌的SOD活性,显著降低心肌内MDA含量。能够保护阿霉素引起的大鼠心肌多方面损伤。红花注射液对阿霉素所致的心肌损害有明显的改善保护作用和抗氧化作用,为临床应用提供了一定的理论基础。
[参考文献]
[1] 王达理,曾爱萍,南柏松. 红花水提物抗自由基保护心肌细胞的作用[J]. 中国中医基础医学杂志,2001,7(2):35.
[2] 张明霞,李效忠,赵磊,等. 红花抗衰老作用的实验研究[J]. 中草药,2001,32(1):52.
[3] 赵先英,张涛,刘毅敏. 右丙亚胺对蒽环类抗肿瘤抗生素心脏保护作用的研究进展[J]. 癌症,2001,20(4):439.
[4] 陈钢. 自由基与中医中药[M]. 北京:中医文献出版社,1993:53.
[5] 徐从高,张茂宏,扬兴季. 癌-照料学原理和实践[M]. 上卷.第5版.济南:山东科学技术出版社,2001:489.
[6] 汪洋.红花注射液对高血压患者氧自由基及红细胞流变性的影响[J].西北药学杂志,2006,21(3):56.
[7] 李翠芳. 红花注射液对心绞痛患者氧自由基的影响[J]. 现代中西医结合杂志,2005,14(1):55-56.
[8] 宋培光. 红花注射液的临床应用[J]. 安徽医药,2005,9(9):707-708.
(收稿日期:2009-03-17)