【摘 要】
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目的探索在不同慢性脑低灌注(CCH)时间点时,认知功能障碍大鼠海马区自噬水平的变化。方法 SD大鼠24只,随机分成4组(均n=6):4周假手术组;4周CCH组;8周假手术组;8周CCH组。用改
【机 构】
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上海交通大学附属上海市第六人民医院神经内科;
【基金项目】
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上海市医学会“神经疾病转化研究”科学基金(编号:SHNR-006)
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目的探索在不同慢性脑低灌注(CCH)时间点时,认知功能障碍大鼠海马区自噬水平的变化。方法 SD大鼠24只,随机分成4组(均n=6):4周假手术组;4周CCH组;8周假手术组;8周CCH组。用改良后两步双侧颈总动脉结扎法构建CCH模型大鼠;采用Morris水迷宫测试各组大鼠空间学习记忆能力;激光散斑血流仪(LSCI)监测各组脑血流(CBF);苏木精-伊红染色观察海马CA1区形态;蛋白印迹法和免疫组化学方法检测海马区自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B、P62表达水平;透射电镜观察海马CA1区自噬泡形成情况。结果与4周假手术组比较,4周CCH组空间学习能力无明显下降;与8周假手术组比较,8周CCH组逃避潜伏期从第2天开始明显延长(均P<0.05),目标象限游泳百分比(35.30±9.83 vs 47.57±13.94,P<0.05)及平台穿越次数(4.29±1.79 vs 6.50±1.73,P<0.05)明显减少;4周CCH组脑血流降低为4周假手术组的(73.87±5.30)%(P<0.001),8周CCH组与8周假手术组脑血流差异无显著性;8周CCH组海马CA1区神经元凋亡数量较4周CCH组增多;CCH组Beclin-1、LC3B、P62表达水平均高于相应假手术组(均P<0.05),尤其8周CCH组的Beclin-1和P62相对表达量较4周CCH组显著增加(P<0.05);8周CCH组Beclin-1及LC3B阳性细胞数量较4周CCH组显著增加(均P<0.05);4周及8周CCH组自噬囊泡样物质均增多,以8周CCH组最为显著。结论 CCH大鼠随时间延长空间学习记忆能力下降,大脑海马区自噬激活伴随自噬降解功能障碍,且自噬功能改变早于认知功能的明显下降。
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