大鼠GAD65基因慢病毒载体的构建及其在MSCs中的表达

• 作 者: 赵元淑 邓镇 陈丽 周玉波 马猛 罗亚楠 胡景鑫 雷水生 朱
• 机 构: 广州医科大学机能学实验中心,广州医科大学生理教研室,广州医科大学附属第五医院皮肤科
• 出 处: 中风与神经疾病杂志
• 发表日期: 2015年5期
• 关键词: 慢病毒 GAD65 间充质干细胞 癫痫 Lentivirus GAD65 Mesenchymal stem cells Epilepsy
• 基金项目: 广州市科技计划项目（No.11C32020697,No.2013J4100103）, 广州市属高校科研计划项目（No.2012c128,No.2012D001）, 2013度企业技术研发与升级改造专项资金项目（No.2013B021800191）

目的构建谷氨酸脱羧酶65（glutamic acid decarboxylase 65,GAD65）重组慢病毒表达载体,感染间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）并进行鉴定。方法 PCR法扩增GAD65基因,构建LV5-GFP-GAD65慢病毒载体;与包装质粒共转染293T细胞包装病毒;将慢病毒感染大鼠MSCs,荧光显微镜鉴定转染率,Western blot检测GAD65的表达。结果双酶切及测序结果表明LV5-GFP-GAD65慢病毒载体构建成功;包装病毒产生的病毒液滴度为