论文部分内容阅读
目的 观察腺病毒介导hFRNK基因对胃泌素所诱导的人结肠癌Col0320WT细胞侵袭力的影响。方法 试验分为胃泌素组、hFRNK组和对照组，胃泌素组用100μmol／L胃泌素诱导结肠癌Col0320WT细胞12h；hFRNK组，首先用脂质体瞬时转染腺病毒受体pCR3．1-CAR于Col0320WT细胞48h，然后用100μmol／L胃泌素干预结肠癌Col0320WT细胞12h，再用重组腺病毒（pAdhFRNK）感染细胞；对照组为未经处理的Col0320WT细胞。用免疫印迹检测hFRNK基因黏着斑激酶（FAK）397位酪氨酸（FAKTyr397）的磷酸化表达，激光共聚焦显微镜观察FAKTyr397在细胞板状伪足的表达情况，免疫共沉淀检测hFRNK基因对四联信号复合物FAK-Src-Dockl80-p130Cas形成的影响，Pull-down法检测hFRNK对Rac蛋白活性的影响。结果 胃泌素诱导后，磷酸化FAKTyr397明显增强；与胃泌素组相比，hFRNK组中FAKTyr397表达下降，FAKTyr397定位到细胞板状伪足的量明显减少，FAK、Src、Dockl80和p130Cas四联信号复合物没有形成，Rac的活性降低。结论 hFRNK基因可阻断胃泌素引起的FAK的磷酸化，阻断FAKTyr397摹积到细胞的板状伪足，阻止四联信号复合物FAK-Src-Dockl80-p130Cas的形成以及Rac的活化，为hFRNK基因防治肿瘤的侵袭和转移提供理论依据。