同源异型核基因1过表达诱导上皮-间充质转化促进乳腺癌细胞转移能力的研究

• 作 者: 王文娟 吕志栋 张琳 宋真 康娜 陈巧玉 李福年
• 机 构: 266000 青岛大学医学院临床医学系,266000 青岛大学附属医院乳腺病诊疗中心,271000 泰安市中心医院外科,266000 青岛大学附属医院乳腺病诊疗中心,266000 青岛大学附属医院手术
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2017年34期
• 关键词: 乳腺癌 上皮-间充质转化 同源异型核基因1 迁移

目的

观察同源异型核基因1(Prrx1)过表达对乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)作用及迁移能力的影响。

方法

用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)从MCF-7、MDA-MB-468、BT-549乳腺癌细胞中筛选出Prrx1低表达细胞株。用Prrx1过表达慢病毒载体感染筛选出的Prrx1低表达乳腺癌细胞株，Western blot验证感染成功后，观察感染前后乳腺癌细胞形态变化。Real-time PCR检测感染对乳腺癌细胞E-钙黏蛋白及波形蛋白表达的影响。Transwell细胞迁移实验检测Prrx1对乳腺癌细胞迁移能力的影响。

结果

乳腺癌MCF-7、MDA-MB-468、BT-549细胞的Prrx1 mRNA的相对表达量分别为15.05±0.18、11.78±0.42、7.98±0.37，因此3种乳腺癌细胞中MCF-7细胞Prrx1表达量最低，Prrx1过表达慢病毒载体感染成功后，MCF-7细胞形态由多角形变为长梭形。Real-time PCR实验结果显示，感染后Prrx1 mRNA在实验组、空白对照组、病毒对照组的相对表达量分别为2.16±0.07、10.18±0.07、10.20±0.07，Prrx1 mRNA水平是感染前的259.57倍(t＝227.100，P＝0.000) ，两对照组比较差异无统计学意义(t＝1.315，P＝0.202) 。感染后E-钙黏蛋白mRNA在实验组、空白对照组、病毒对照组的相对表达量分为别4.00±0.02、3.56±0.02、3.51±0.05，E-钙黏蛋白mRNA水平是感染前的0.71倍(t＝6.007，P＝0.000)，而两对照组比较差异无统计学意义(t＝0.730，P＝0.476)。感染后波形蛋白mRNA在实验组、空白对照组、病毒对照组的相对表达量分别为8.79±0.42、10.18±0.06、9.97±0.05，波形蛋白mRNA水平是感染前的2.27倍(t＝11.900，P＝0.000)，两对照组比较差异无统计学意义(t＝2.052，P＝0.057)。Transwell实验显示Prrx1过表达组发生迁移的细胞数[(73.40±10.21)个]高于病毒对照组[(44.60±8.24)个]及空白对照组[(45.60±6.62)个]，差异有统计学意义(t＝6.837，P＝0.000)，空白对照组和病毒对照组差异无统计学意义(t＝0.295，P＝0.772)。

结论

Prrx1基因过表达可诱导乳腺癌细胞发生EMT使其迁移能力增强。