抗Her-2-scFv-SEC2融合免疫毒素的构建和功能研究

• 作 者: 徐明恺 张成刚 张惠文 周亚凤 张先恩 刘丽
• 机 构: 中国科学院沈阳应用生态研究所,中国科学院武汉病毒研究所
• 出 处: 生物化学与生物物理进展
• 发表日期: 2006年8期
• 关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素C2 抗人表皮生长因子受体HER-2 融合免疫毒素 肿瘤靶向 pASK75表达载体 staphylococcal enterotoxin C
• 基金项目: 辽宁省科技计划项目（2001305003）.Acknowledgements We thank Dr. J. D. Marks, University of California, San Francisco for providing the pCynB1 plasmid and Prof. C. E. McKenna of University of Southern California f

用基因工程方法，将金黄色葡萄球菌肠毒素C2与抗人表皮生长因子受体HER-2单链抗体scFv-B1，以一连接短肽连接，构建融合免疫毒素B-L-SEC2，并用改进的新型表达载体pASK75-EX，在大肠杆菌BL21（ED3）中表达．以不溶性包涵体形式表达的目的蛋白经变性后以镍离子螯和层析纯化，并以透析法进行复性．流式细胞术和MTT实验结果表明，纯化复性的融合免疫毒素B-L-SEC2，在体外具有与HER-2过表达的靶细胞SK-Br-3特异性结合的活性，并对该细胞产生显著的特异性生长抑制作用．