【摘 要】
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目的构建表达人前列腺癌诱导基因1(PTI-1)蛋白的重组质粒,在大肠杆菌中诱导高效表达并纯化. 方法应用亚克隆PTI-1基因的pUC19/PTI-1质粒,重新构建表达载体PTI-1/pGEX4T-1,酶
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目的构建表达人前列腺癌诱导基因1(PTI-1)蛋白的重组质粒,在大肠杆菌中诱导高效表达并纯化. 方法应用亚克隆PTI-1基因的pUC19/PTI-1质粒,重新构建表达载体PTI-1/pGEX4T-1,酶谱分析鉴定出正确的重组质粒,诱导表达,进行SDS-PAGE分析,应用GSH树脂纯化表达产物. 结果筛选出5个与 pGEX4T-1正向重组质粒,其中一株表达一个Mr为69 000的新蛋白,并以包涵体的形式存在,蛋白在宿主菌中高效表达,表达量为43.2%,纯化蛋白得到纯度为79.72%的GST/PTI-1融合蛋
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