大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

• 作 者: 王耀 李燕虹 吴佳蓓 邢云瑞 曹金博 陈秀金 李兆周 邓瑞广
• 机 构: 河南科技大学食品与生物工程学院,河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室
• 出 处: 中国食品学报
• 发表日期: 2020年7期
• 关键词: 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子 单克隆抗体 免疫学特性 soybean Bowman-Birk inhibitormonoclonal antibo
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31702218),国家科技支撑计划项目(2014BAD13B05),河南省自然科学基金项目(182300410038),河南省高等学校重点科研项目(18B550001),河南省动物免疫学重点实验室开放课题(PKLAI20170603)

为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性。选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI m Ab的稳定杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL。经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,