昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白及其生物学功能的初步鉴定

• 作 者: 郭阳 郑静 胡愉 崔莲仙 何维
• 机 构: 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系
• 出 处: 基础医学与临床
• 发表日期: 2009年12期
• 关键词: TCRγ9/δ2-Fc 昆虫杆状病毒表达系统 TCRγ9/δ2-Fc baculovirus vector expression system

目的建立昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白技术平台并鉴定其表达产物的生物学功能。方法用搭桥PCR获得γ9Fc和δ2（OT3）Fc基因片段,构建成pBACp10ph-γ9/δ2（OT3）-Fc重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫sf9细胞,表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白;Western blot鉴定TCRγ9/δ2-Fc蛋白表达位置;胞内流式细胞仪检测γ9Fc和δ2（OT3）Fc两基因表达效率;蛋白G亲和层析后,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度;激光共聚焦扫描显微镜技术和生物传