家蚕核型多角体病毒成纤维细胞生长因子基因的表达和定位

• 作 者: 宋志秀 李兵 王文兵 沈卫德
• 机 构: 南京中医药大学第二临床医学院,苏州大学生命科学学院,江苏大学生命科学研究院
• 出 处: 蚕业科学
• 发表日期: 2006年2期
• 关键词: 家蚕核型多角体病毒 成纤维细胞生长因子 表达 纯化 Bombyx mori nucleopolyhedrosis virus Fibroblast growth
• 基金项目: 国家重点基础研究发展计划“973”项目（编号XIBCB121005）,江苏大学自然科学创新预研摹金项目（编号04CX08）.

为了解杆状病毒基因组中成纤维细胞生长因子基因（fgf）的功能，分离纯化了BmNPVDNA，采用PCR方法获得了BmNPV的faf基因，并克隆至原核表达载体pET28a，构建了高效原核表达质粒pET28a-fgf.通过IPTG诱导表达后，经SDS-PAGE检测证实了在27kD左右有一特异条带．与预测的蛋白质分子量大小一致，并通过Ni^2＋-NTA离子交换树脂亲和纯化了目的蛋白。同时构建了融合GFP的真核表达载体pCDNA3．1-gfp-fgf，通过脂质体转染进入COS-7细胞进行表达和定位观察。fgf基因产