【摘 要】
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目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α在小鼠胚胎椎体发育过程中的表达规律及其调节作用.方法在解剖显微镜及光学显微镜下观察小鼠胚胎椎体骨发育的演变过程;应用逆转录聚合酶链式
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目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α在小鼠胚胎椎体发育过程中的表达规律及其调节作用.方法在解剖显微镜及光学显微镜下观察小鼠胚胎椎体骨发育的演变过程;应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化方法,检测小鼠胚胎椎体在发育不同时段HIF-1α表达状况,及与血管内皮生长因子(VEGF)、软骨和骨标记基因的表达关系.结果胚胎第13.5天(E13.5)时,软骨性脊柱形成;E15.5时,椎体内形成小的骨化核,之后初级骨化中心逐渐增大,并向头尾两端延伸.E13.5时,可检测到HIF-1α的mRNA表达,E14.5时,HIF-1α的表达水平达高峰(组间比较P＜0.05),其后逐渐降低,至出生前只有很少量表达;VEGF mRNA表达时相同HIF-1α表达一致;软骨和骨标记基因的表达与形态学演变相符.E14.5时,免疫组化检测到HIF-1α蛋白在椎体中心表达,延续表达时间较mRNA长.结论椎体发育表现为软骨内成骨过程,存在低氧环境,伴随有HIF-1αmRNA及蛋白量的增加及其下游基因VEGF的表达,这可能与HIF-1α激活下游基因启动椎体软骨内骨化过程有关.
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