尼古丁对脐静脉内皮细胞蛋白激酶C和Ras蛋白活性及胞浆钙浓度的影响

• 作 者: 周卫辉 陈祥银
• 机 构: 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室,中国医学科学院中国协和医科大学基础
• 出 处: 基础医学与临床
• 发表日期: 2001年5期
• 关键词: 尼古丁 钙 蛋白激酶C RAS蛋白 内皮细胞 nicotine calcium Protein Kinase C Ras protein. endothe

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化,用γ-32P-ATP掺入法检测PKC活性,用GST-RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含量.观察到(1～5)10-4mol/L尼古丁使人脐静脉内皮细胞[Ca2+]i迅速增加,峰值约超过基础值50%～200%,钙通道阻滞剂尼莫地平可拮抗尼古丁的此种效应;10-4mol/L尼古丁作用1～12h后胞浆PKC活性明显降低; 而胞膜PKC活性则升高.1