RNA干扰抑制转化生长因子-βⅡ型受体的表达改善食管癌术后吻合口狭窄

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目的 观察抑制转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)表达对食管成纤维细胞参与瘢痕形成的影响.方法 利用5例食管癌术后患者吻合口狭窄处的活检组织,原代培养食管成纤维细胞并行细胞免疫化学鉴定.针对人TGF-βRⅡ基因序列设计合成的小片段RNA(siRNA)转染成纤维细胞,荧光显微镜观察转染效率;采用Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-βRⅡ和纤维粘连蛋白的表达;细胞划痕实验评价细胞迁移能力.结果 原代食管成纤维细胞培养成功,细胞抗波形蛋白免疫荧光阳性.针对TGF-βRⅡ的siRNA转染成纤维细胞48 h后转染效率达80%以上,与对照组比较明显抑制了TGF-βRⅡ和纤维粘连蛋白的表达(P<0.05),并抑制了成纤维细胞(70.6±9.5)%的迁移能力.结论 使用RNA干扰技术沉默食管成纤维细胞TGF-βRⅡ的表达抑制了其在瘢痕形成中的作用.
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