口蹄疫病毒VP2基因的原核表达及抗原性检测

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yfj7874
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
将口蹄疫病毒VP2基因连接到原核表达载体pPROEX^TM HTb上,获得重组质粒pPR-VP2。将此质粒转化感受态菌DH5α中,经终浓度为1.0mmol/L的IPTG诱导,1h~6h依次收集菌液,SDS-PAGE电泳分析,在4h后表达量可达到高峰。经过软件分析,表达产物占总菌体蛋白的23.1%,大小为33Ku左右。根据Ni-NTA纯化系统说明操作,获得较纯的VP2融合蛋白。以牛抗O型口蹄疫病毒血清为第一抗体,通过Western blot和Dot ELISA鉴定,纯化后的VP2融合蛋白可以与牛抗O型口蹄疫
其他文献
鸡抗菌肽属β-防御素类,在鸡的先天性免疫中发挥重要作用。本研究将克隆得到的鸡β-防御素-10基因(AvBD10)亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中构建了重组表达质粒pGEX-AvBD10。将
采用PCR方法克隆猪圆环病毒2型(PCV2)Rep和Cap蛋白基因,以串联的方式依次克隆到pMD18-T载体中。经鉴定后亚克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV。重组穿梭质粒用PmeI线性化后与腺
根据抗菌肽CAP18活性片段的氨基酸序列,采用SOE技术,设计合成了CAP18的编码基因,将其克隆至pMD18-T载体,进行序列测定后亚克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coil BL21(DE3)中表达融合蛋白
通过RT.PCR法获得阿克苏(Akesu/O/58)FMDV结构蛋白基因vp1,将该基因克隆到pGEM.TEasy载体进行核苷酸序列测定。将vp1基因、Kozak序列等插入中间表达质粒pBin438,构建重组中间表达载体
利用PCR方法扩增产单核细胞李斯特菌(LM)的溶血素基因hlyA,获得一条大小约为1600bp的目的片段,将其与pMD18-T载体连接,经酶切、PCR鉴定,命名为pMD18-T—hlyA。测序结果显示所扩增的