【摘 要】
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目的 :通过特异性小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)抑制人黑素瘤A375细胞中表皮生长因子样结构域蛋白6(epidermal growth factorlike-domain 6,EGFL 6)基因表达,探
【机 构】
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广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,暨南大学抗体工程研究中心,
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目的 :通过特异性小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)抑制人黑素瘤A375细胞中表皮生长因子样结构域蛋白6(epidermal growth factorlike-domain 6,EGFL 6)基因表达,探讨EGFL 6基因沉默对人黑素瘤细胞增殖及侵袭的影响。方法:设计合成靶向EGFL 6基因的siRNA(命名为EGFL6-siRNA),通过脂质体转染法将该siRNA转染入黑素瘤A375细胞,然后采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测黑素瘤A375细胞中EGFL6 mRNA及蛋白的表达水平,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法和Transwell实验分别检测A375细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:在成功转染EGFL6-siRNA 48 h后,A375细胞中EGFL6 mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P值均<0.01)。EGFL6-siRNA转染组A375细胞在转染后24~72 h各时间点的细胞增殖能力均受到明显抑制(P值均<0.01),且细胞侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:特异性siRNA能够有效地沉默人黑素瘤A375细胞中EGFL 6基因的表达,并抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。
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