【摘 要】
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采用重组ＰＣＲ技术将已获得的抗癌胚抗原（ＣＥＡ）鼠源单克隆抗体Ｅ７Ｂ１０重、轻链可变区基因（ＶＨ、Ｖκ）经（Ｇｌｙ３Ｓｅｒ）３编码的寡核苷酸拼接成单链抗体基因，并在大肠杆菌中高效表达了单链抗体Ｃ端的融合蛋白，其表达量达到菌
【机 构】
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上海第二医科大学附属瑞金医院,中国科学院上海生物化学研究所
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采用重组ＰＣＲ技术将已获得的抗癌胚抗原（ＣＥＡ）鼠源单克隆抗体Ｅ７Ｂ１０重、轻链可变区基因（ＶＨ、Ｖκ）经（Ｇｌｙ３Ｓｅｒ）３编码的寡核苷酸拼接成单链抗体基因，并在大肠杆菌中高效表达了单链抗体Ｃ端的融合蛋白，其表达量达到菌体总蛋白的２０％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹图谱显示表达产物分子量为２７ｋＤ，与其基因编码蛋白的理论推算值相符。表达产物在胞内主要以不溶性包含体存在，经变性和复性处理后，ＲＩＡ和竞争ＥＬＩＳＡ表明表达产物具有结合其特异性抗原ＣＥＡ的能力
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