【摘 要】
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目的:在白血病细胞系U937中建立四环素诱导的WT1基因表达系统.方法:运用脂质体将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-WT1分别转染逆转录病毒的包装细胞PT67以产生逆转录病
【机 构】
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成都市第三人民医院,成都理工大学计算机系
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目的:在白血病细胞系U937中建立四环素诱导的WT1基因表达系统.方法:运用脂质体将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-WT1分别转染逆转录病毒的包装细胞PT67以产生逆转录病毒.将逆转录病毒RevTet-On感染U937细胞,经G418筛选,产生抗性细胞,用有限稀释法将U937/Tet-On抗性细胞单克隆化.14天后,克隆逐步形成,在显微镜下标记并移出.再将逆转录病毒RevTRE-Luc瞬时感染这些克隆,培养基中加入强力酶素(Dox)2mg/L或不加Dox,应用荧光素酶报告
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