【摘 要】
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为筛选与毛叶山桐子性别相关的分子标记,本研究优化了毛叶山桐子ISSR-PCR反应体系,并利用优化后的体系逐一筛选100条ISSR引物,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行多态性检测.实
【机 构】
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四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
【基金项目】
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四川省科技计划项目(2011HH 0006);四川省支撑课题(2011JZ 0002)
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为筛选与毛叶山桐子性别相关的分子标记,本研究优化了毛叶山桐子ISSR-PCR反应体系,并利用优化后的体系逐一筛选100条ISSR引物,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行多态性检测.实验确立出最佳的25μL反应体系为：55ng DNA模板,1 U Taq酶,2μL dNTPs（2.5mmol/L）,2μL引物（10μmol/L）,2.5μL 10×Taq Buffer（含Mg2＋）,超纯水补足总25μL.利用该体系逐一筛选ISSR引物,在多次重复后只有UBC841引物扩增出的差异性条带可以稳定存在.P
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