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目的 建立检测棘鳞蛇鲭(Ruvettus pretiosus,RP)和异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum,LF)两种油鱼的双重实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法.方法 基于棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(CO Ⅰ)基因分别设计特异性引物和探针,并对方法进行灵敏度、特异性和重复性分析,建立双重实时荧光PCR方法.结果 模板量在8.4× 105～8.4× 100 copies/μl范围内,方法具有良好的线性关系,棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭的线性回归方程分别为y=-3.18x+41.0(R2 =0.998 8)和y=-3.37x+44.5(R2 =0.998 6),方法组内相对标准偏差(RSD)为0.29％ ～ 0.84％.其中,检测棘鳞蛇鲭的组内RSD为0.29％ ～ 0.84％,检测异鳞蛇鲭的组内RSD为0.29％～0.62％.方法最低检测限为16.8 copies/反应,并且从随机购买的50份鳕鱼样品中鉴定出油鱼成分棘鳞蛇鲭.结论 本试验建立的双重实时荧光PCR方法能够特异性地鉴定出棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭,具有实际应用潜力.