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目的 改进目前基于PCR的方法制备siRNA表达框，转染细胞后产生高效的RNA干扰作用。方法从K562细胞中提取基因组DNA，以此为模板，PCR扩增U6启动子序列并克隆至pMD18-T载体中，用载体上的引物进行扩增，所得产物即制成作为扩增siRNA表达框的模板。选择p53为靶基因，扩增制备siRNA表达框，测序验证后，转染SH—SY5Y细胞48h后提取RNA进行RT—PCR，检测RNA干扰的效应。结果测序结果表明所克隆的U6启动子序列正确。细胞转染表达框，在mRNA水平上，p53基因的表达明显受到了抑制。