小鼠泛素结合酶UBE2W的抗体制备及组织表达谱分析

• 作 者: 张莹莹 朱恒奇 赵莉霞 周晓巍 黄培堂
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所
• 出 处: 生物工程学报
• 发表日期: 2008年4期
• 关键词: 泛素结合酶 UBE2W 抗体 组织表达谱 ubiquitin conjugating enzyme UBE2W antibody tissue expre
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（No.30470379）资助.致谢 美国Wake Forest University Health Sciences卢柏松博士为本研究提供原始质粒和技术指导,在此表示感谢.

泛素结合酶（E2）是蛋白泛素化修饰所需的第二个连接酶，在泛素转移和底物特异性识别过程中发挥着重要作用。UBE2W是一种新发现的E2酶，其果蝇属同源蛋白可能在光转导或视网膜变性过程中发挥作用，鼠和人同源蛋白功能未见报道。生物信息学分析UBE2W鼠源氨基酸序列，发现UBE2W具有典型的UBC结构域并在多种物种高度保守。通过构建UBE2W原核表达质粒，在大肠杆菌中表达并纯化了GST-UBE2W融合蛋白。以此纯化蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备抗UBE2W多抗血清，并利用制备的UBE2W抗原柱亲和纯化UBE2W多抗