【摘 要】
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[目的]以海洋脂肪酶为研究目标,从5种甲壳素和9种壳聚糖中筛选出来最优载体甲壳素J3(ACMEC),利用该载体进行戊二醛交联固定化海洋假丝酵母脂肪酶.[方法]经过单因素和正交实验
【机 构】
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中国科学院 南海海洋研究所/热带海洋生物资源与生态重点实验室/广东省海洋药物重点实验室,广东 广州510301;南方海洋科学与工程广东省实验室(广州),广东 广州 511458;广东省中医院,广东 广
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[目的]以海洋脂肪酶为研究目标,从5种甲壳素和9种壳聚糖中筛选出来最优载体甲壳素J3(ACMEC),利用该载体进行戊二醛交联固定化海洋假丝酵母脂肪酶.[方法]经过单因素和正交实验进行了固定化条件优化,分析了对固定化效果影响显著的因素;对比了固定化酶和游离酶的酶学性质参数,并进行模拟扩大固定化实验.[结果]利用甲壳素载体(ACMEC)固定化海洋假丝酵母脂肪酶,其最佳固定化条件为:戊二醛1%,交联温度30℃,交联时间2 h、pH 5.0、固定化1 h、载体0.5 g、固定化温度25℃;实验发现对酶活影响最显著的因素是载体量.将载体量扩大20倍后进行制备固定化酶,该固定化酶J3的酶活达到(170±10)U/g,与未扩大之前并无差别.将该固定化酶J3与游离酶进行酶学性质表征,发现该固定化酶最适反应pH由中性7.0变化为弱碱性8.0,可以耐受较酸性环境和70℃的温度条件,重复使用6次剩余50%酶活,4℃下保存30 d仍残留50%左右的酶活力.[结论]研究为甲壳素交联固定化海洋脂肪酶提供了技术和参数支持.该方法制备的固定化酶J3重复使用性优异,具备工业开发和应用的潜力.
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