【摘 要】
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目的 研究2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2,Raav2)载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)对体外培养兔晶状体
【机 构】
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410008,湖南省长沙市,中南大学湘雅医院眼科
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目的 研究2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2,Raav2)载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)对体外培养兔晶状体上皮细胞(N/N1003A)的转染和病毒载体对晶状体上皮细胞增生的影响,探讨Raav2作为后囊膜混浊基因治疗载体的可行性.方法 Raav2-EGFP按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为104、105、2×105、106转染N/N1003A细胞,倒置荧光显微镜下观察晶状体上皮细胞中EGFP的表达,流式细胞仪检测Raav2-EGFP对N/N1003A细胞的转染效率,MTT比色法测定Raav2载体对N/N1003A增生的影响.结果 EGFP在细胞中的表达呈绿色,弥漫于整个胞浆.rAAV2-EGFP的转染效率随着MOI的增加和时间的延长而增加,MOI=106时,转染后第7 d达到71.12%.MTT法显示各转染组与未转染组A值无统计学差异.结论 重组腺相关病毒载体可以介导EGFP基因高效稳定转染晶状体上皮细胞,并且对细胞增生无抑制作用,腺相关病毒作为后囊膜混浊基因治疗载体是可行的.
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