胃泌素释放肽前体融合蛋白的制备及其在肿瘤研究中的应用

• 作 者: 朱爱萍 张青云 王雅明 徐建军 邓丽娟
• 机 构: 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院检验科,山西医科大学第二医院检验科
• 出 处: 中国药物与临床
• 发表日期: 2007年11期
• 关键词: 胃泌素释放肽 克隆 制备 应用 Gastrin releasing peptide Cloning Preparation Application

目的克隆胃泌素释放肽前体（pro—GRP）基因、构建重组质粒pGEM—T—pro—GRP和表达载体PMS-31b—pro—GRP、在大肠杆菌中热诱导表达并制备融合蛋白。方法从BGC823胃癌细胞中提取总RNA，利用pro—GRP特异引物，扩增人pro—GRP分子的cDNA全长。将pro—GRP基因定向克隆于pGEM—T载体转化JM109，DNA测序鉴定基因序列。将pro—GRP基因定向克隆于原核高效表达载体PMS-31b，转化大肠杆菌POP2136经42℃热诱导表达MS2-pro—GRP融合蛋白。将融合蛋