下调大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素转换酶的表达

来源 :中西医结合心脑血管病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qq165247254
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目的构建腺病毒载体使其携带血管紧张素转换酶(ACE)基因短发夹RNA(shRNA),观察选择性下调大鼠血管平滑肌细胞ACE表达。方法从之前构建的真核表达载体p-ACE-shRNA中扩增ACE-shRNA片段,采用RTPCR法并克隆进穿梭质粒pDC316中,将构建好的pDC316ACEshRNA穿梭质粒载体和pBHGlox-E1,3Cre骨架病毒共转染293细胞,进行病毒颗粒包装重组、滴度测定和纯化。随后进行原代培养大鼠血管平滑肌细胞转染,通过实时荧光定量PCR分别在转染前及转染后24h、48h、72h检测
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