【摘 要】
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目的从菌株Actinoplanes teichomyceticus sp.FIM-1112发酵液中快速提取纯化替考拉宁,并建立替考拉宁5个单组份A2-1、A2-2、A2-3、A2-4和A2-5的快速制备方法。方法采用碱化、
【基金项目】
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福建省科技计划重点项目(2012Y0078);福建省自然科学基金项目(2012J01307);福州市科技计划重点项目(2013-PT-42);国家“重大新药创制”课题(2012ZX09301002-003)
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目的从菌株Actinoplanes teichomyceticus sp.FIM-1112发酵液中快速提取纯化替考拉宁,并建立替考拉宁5个单组份A2-1、A2-2、A2-3、A2-4和A2-5的快速制备方法。方法采用碱化、HP-20大孔树脂柱分离、沉淀、脱色、冷却沉淀等技术,快速提取纯化替考拉宁;结合制备液相色谱分离技术[制备柱Welch Column XB-C18(250mm×21.2mm i.d.,5μm),流动相A为3.2g/L Na H2PO4-乙腈(900:100);流动相B为2.75g/L Na H2PO4-乙腈(300:700),流速为10.0m L/min,检测波长为254nm]分离制备替考拉宁5个单组份。结果 A2组份的收率提高至76%,HPLC结果显示各组份的含量均符合欧洲药典标准,且各组份纯度分别为94.90%(A2-1),96.86%(A2-2),84.75%(A2-3),80.16%(A2-4)和78.59%(A2-5)。结论该提取纯化方法经过优化,简单、快速、易于操作,且首次采用制备色谱分离技术对其5个组份进行分离,可用于替考拉宁单组份的分离制备。
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