重组超氧化物歧化酶1／3杂合酶在大肠杆菌中表达的优化

• 作 者: 宋筱龄 范立强 容智凤 赵健 李素霞 袁勤生
• 机 构: 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
• 出 处: 食品与药品
• 发表日期: 2008年6期
• 关键词: 超氧化物歧化酶 杂合酶 表达 优化 superoxide dismutase hybrid enzyme expression optimization

目的获取活性高的重组SOD1／3杂合酶。方法用含pET—SOD1／3的工程菌诱导表达重组SOD1，3杂合酶，通过分析SDS—PAGE及SOD酶活性，考察诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、Cu^2＋、Zn^2＋浓度对重组酶表达量和活性的影响。结果正交试验表明，用lmmol／L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）在A600=1．2时诱导，Cu^2＋、Zn^2＋浓度分别为2．4mmol／L，诱导温度15℃，诱导时间12h，能获得高活性重组SOD1／3，其比活性为1681U／mg。结论培养温度和Cu^2＋、Zn