【摘 要】
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目的:本文旨在探讨重楼皂苷I(Polyphyllin I,PPI)抑制非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)生长的作用及机制.方法:通过MTT测定法及克隆形成实验检测PPI对2种不同
【机 构】
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湖北医药学院基础医学院;湖北医药学院胚胎干细胞湖北省重点实验室;武当特色中药研究湖北省重点实验室,湖北 十堰 442000
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目的:本文旨在探讨重楼皂苷I(Polyphyllin I,PPI)抑制非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)生长的作用及机制.方法:通过MTT测定法及克隆形成实验检测PPI对2种不同肺癌细胞系(PC9和H460)体外增殖能力的影响;通过Western Blot和免疫荧光实验进行自噬检测;通过Western Blot检测PPI对AMPK/mTOR及其下游信号通路的影响;通过Western Blot检测AMPK抑制剂Compound C(CC)对PPI诱导的自噬激活的影响;通过分子对接分析PPI与AMPK的结合作用;通过微量热泳动实验和基于靶点稳定性的药物结合实验检测PSVⅡ与AMPK的亲和力.结果:PPI在低微摩尔浓度剂量下能够显著抑制NSCLC细胞的增殖;PPI能够诱导NSCLC细胞发生自噬;PPI能够在NSCLC细胞中激活AMPK/mTOR信号通路;CC能够逆转PPI诱导的自噬激活;PPI与AMPK具有直接结合作用.结论:PPI通过直接靶向活化AMPK诱导NSCLC细胞发生自噬进而抑制NSCLC细胞生长和增殖.
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