牛脂联素基因cDNA克隆

来源 :黑龙江畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q363342684
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应用RT—PCR方法先提取成牛肝脏外部脂肪和犊牛大网膜前脂肪细胞培养物(第13日龄)总RNA,先后扩增出ADPNcDNA的501bp片段基因,分别克隆到载体PMD18-T中,构建重组载体PMD18-T/牛ADPN1和PMD18-T/牛ADPN2。筛选出阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定和重组质粒PCR鉴定后对其进行测序。结果表明:ADPN1和ADPN22次测序结果完全一致;从脂肪组织总RNA中扩增得到501bp片段ADPN基因,其cDNA序列与GenBank牛ADPN基因序列同源性为85%,其氨基酸同源性
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