扩增片段多态性结合银染法对广西汉族人FⅧ基因内(CA)n的研究

• 作 者: 朱春江 刘敬忠 欧维琳 龙桂芳 梁燕 王战勇 郑明慈
• 机 构: 541001 广西桂林医学院附属医院儿科,首都医科大学附属北京朝阳医院基础医学研究中心,541001 广西桂林医学院附属医院儿科,广西医科大学第一附属医院血红蛋白实验室,首都医科大学附属北京朝阳医院基
• 发表日期: 2007年45期
• 关键词: 实际杂合度 血友病 A 血友病甲 家系分析 扩增片段多态性 银染色法 CA)n 银染法 基因频率 聚合酶链反应

目的

研究广西汉族人群在FⅧ基因内含子13(CA)n及内含子22(GT)n(AG)n两位点的基因频率分布，并用于血友病甲的家系分析。

方法

采用聚合酶链反应(PCR)扩增FⅧ基因内含子13(CA)n及22(GT)n(AG)n的多态性片段，银染色法显示扩增结果；任选一标本，测其扩增片段长度获得其i13(CA)n及i22(GT)n(AG)n的具体重复数，从而推算出所有标本两位点的二核苷酸重复数。

结果

在91名广西汉族人135条X染色体中，共检出6种i13(CA)n和4种i22(GT)n(AG)n，i13(CA)n位点基因频率在0.0002~0.5408间，多态信息量(polymorphism information content，PIC)为0.5899，实际杂合度为0.6364(28/44)；i22(GT)n(AG)n位点基因频率为0.0444~0.4963, PIC为0.5359，实际杂合度为0.5227(23/44)。13个有阳性家族史的血友病家系，用该方法进行家系分析， 9个家系可作出诊断，可诊断率为69%。

结论

(1) i13(CA)n、i22(GT)n(AG)n在广西汉族人中PIC高，是血友病甲家系分析中的有用位点；(2)相比FⅧ相关的某些单个限制性片段长度多态性位点(restrictive fragment length polymorphism, RFLP)，i22(GT)n(AG)n是一个较为有用的位点。