【摘 要】
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目的 探讨维生素D体内活性形式1,25(OH)2D3对关节滑膜蛋白聚糖-4(proteoglycan 4,PRG4)基因表达及分泌的影响.方法 新西兰大白兔,分离膝关节滑膜体外培养.首先用10 nM浓度1,2
【机 构】
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300162 天津,武警特色医学中心特战创伤急救技术研究所;300309 天津,武警后勤学院卫生勤务系;300309 天津,武警后勤学院基础部
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目的 探讨维生素D体内活性形式1,25(OH)2D3对关节滑膜蛋白聚糖-4(proteoglycan 4,PRG4)基因表达及分泌的影响.方法 新西兰大白兔,分离膝关节滑膜体外培养.首先用10 nM浓度1,25(OH)2D3进行试验.Real time-PCR检测PRG4基因表达,ELISA法检测培养液中PRG4分泌量的变化,确定1,25(OH)2D3作用后PRG4基因表达和PRG4分泌的最佳时间点.之后用不同浓度1,25(OH)2D3进行刺激,在最佳时间点测定1,25(OH)2D3对关节滑膜PRG4基因表达及分泌的影响.结果 Real time-PCR分析显示,1,25(OH)2D3作用6 h后PRG4 mRNA水平开始上调,24 h时PRG4 mRNA表达水平达峰值.ELISA分析结果显示,1,25(OH)2D3作用12 h时滑膜培养液中PRG4蛋白含量开始明显升高,48 h时滑膜培养液中PRG4蛋白含量达最高.Real time-PCR分析显示,在0.1～100 nM浓度范围内1,25(OH)2D3均促进关节滑膜PRG4基因表达,随着1,25(OH)2D3浓度的提高,PRG4基因表达上调逐渐提高.ELISA分析显示,1,25(OH)2D3在0.1～100 nM浓度范围内均促进关节滑膜分泌PRG4,随着1,25(OH)2D3浓度的提高,滑膜分泌PRG4量逐渐增加.结论 1,25(OH)2D3对滑膜PRG4基因表达及分泌有明显的促进作用.
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