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目的:探讨中期因子(midkine,MK)诱导肠癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)促进结直肠癌增殖和侵袭的分子机制。方法:MTT法检测MK对肠癌细胞增殖及侵袭的影响,倒置显微镜下观察其形态学变化,Western blot检测其EMT标志物、NF-κB(p65)、Zbe1和MMP-9蛋白表达变化。结果:在10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml和200ng/ml的MK作用下,SW480细胞的增殖率分别为:(106.33±4.57)%、(119.83±6.01)%、(148.52±8.3 1)%和(1 6 2.5 1±8.9 8)%,(F=70.954,P<0.01);HCT116细胞的增殖率分别为:(116.49±9.77)%、(129.79±2.31)%、(155.38±8.98)%和(158.11±6.75)%,(F=55.027,P<0.01)。100ng/ml MK作用下,SW480细胞的侵袭数为每视野(40.34±2.52)个,而NF-κB信号通路抑制剂5μmol/L Bay11-7082预处理后的侵袭数为每视野(14.13±2.06)个,(F=41.391,P<0.01);HCT116细胞的侵袭数为每个视野(42.21±3.25)个,而Bay1 1-7 0 8 2预处理后的细胞侵袭数为每视野(14.32±2.52)个,(F=69.206,P<0.01)。MK诱导SW480和HCT116呈现梭形或长条形改变,E-cad蛋白表达下调,Vimentin、β-catenin、NF-κB(p65)和MMP-9蛋白表达上调,而Zbe1蛋白表达无明显变化。结论:MK通过上调NF-κB(p65)信号蛋白诱导肠癌细胞上皮间质转化,促进下游靶蛋白MMP-9表达上调,从而促进肠癌细胞增殖和侵袭。