柱前衍生化高效液相色谱法测定酶法拆分的DL半-胱氨酸含量

• 作 者: 段静静 彭佳敏 曹美荣 李鸣 侯洁
• 机 构: 南开大学药学院
• 出 处: 南开大学学报(自然科学版)
• 发表日期: 2012年1期
• 关键词: 柱前衍生化 HPLC L半-胱氨酸脱巯基酶 D半-胱氨酸 手性拆分 precolumn derivatization HPLC L-cysteine desul

建立了以1-氟-2,4-二硝基苯基-5-L-丙氨酰胺（FDAA）为手性衍生化剂、高效液相色谱法测定半胱氨酸对映异构体含量的方法.采用Inertex-C18色谱柱,以乙腈-水（含0.1%TFA）为流动相进行梯度洗脱,L-半胱氨酸、D-半胱氨酸分别在（2.50～20）mmol/L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.998 3和0.998 4）;其平均回收率分别为100.1%（RSD=0.67%）和99.6%（RSD=0.92%）.利用上述方法对重组表达的L-半胱氨酸脱巯基酶拆分DL-半胱氨酸外消旋体混