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目的
采用基于液态芯片的K-ras基因分型检测方法分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织样本中的K-ras基因突变水平,指导非小细胞肺癌患者个体化靶向治疗和预后评估。
方法实验诊断技术研究方法。对液态芯片的K-ras基因分型检测方法进行灵敏度和重复性的评估。选取2011年11月至2012年2月上海市胸科医院的100例非小细胞肺癌患者新鲜组织样本,提取基因组DNA,通过采用PCR-连接酶检测反应(LDR)结合液态芯片技术,对待测样品K-ras基因2号外显子上12、13密码子上8个突变位点进行分析,并通过测序验证结果。
结果液相芯片技术检测灵敏度为10%~20%,高于传统测序法的1%。平均CV值<1%,表现出很好的重复性。从100例NSCLC患者组织样本中共检出5例突变,其中3例为Gly12Val突变,2例为Gly12Asp突变。
结论基于液态芯片与PCR-LDR技术的K-ras基因分型检测方法检测通量高、灵敏度高、重复性好,是NSCLC患者个体化治疗及预后判断的K-ras基因突变分析的合理方法。(中华检验医学杂志,2013,36:704-707)