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从鱼油中分离制备得到二十碳五烯酸（EPA）甲酯和二十二碳六烯酸（DHA）甲酯，采用红外光谱、质谱、核磁共振波谱等手段对EPA甲酯和DHA甲酯的结构进行表征，提供了不饱和脂肪酸甲酯标准物质研制基础。样品的红外光谱（IR）、质谱（MS）、核磁共振谱图（1HNMR、13CNMR）所给出的结构信息与EPA甲酯和DHA甲酯的化学结构式相符，并通过DEPT谱和I3C-1H COSY化学位移相关谱（HMBC）对各共振峰进行了指认，样品的谱图数据与文献报道基本一致。