分泌IL-10的B细胞诱导Tregs细胞的机制研究

• 作 者: 赵艳 曹国琴 赵思淇 林江
• 机 构: 哈尔滨医科大学附属第四医院口腔科 150001,哈尔滨医科大学附属第四医院口腔科 150001,哈尔滨医科大学附属第四医院口腔科 150001,哈尔滨医科大学附属第四医院口腔科 150001
• 出 处: 国际免疫学杂志
• 发表日期: 2019年42期
• 关键词: Interleukins-10 B cells Regulatory T cells CD4 + T cells

目的

探讨分泌白细胞介素(interleukin，IL)-10的B细胞诱导CD4^＋T细胞向调节性T细胞(regulatory T cells，Tregs)转化的机制。

方法

免疫磁珠法分离C57BL/6J小鼠脾脏B细胞，CD40L抗体刺激B细胞48 h，培养43 h时，向培养液中加入脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)＋佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate，PMA)＋离子霉素＋莫能霉素，逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)检测IL-10 mRNA表达水平。免疫磁珠法分离C57BL/6J小鼠脾脏CD4^＋T细胞，根据培养条件不同，将细胞分成四组，对照(Control)组；共培养(Co-culture)组；非接触培养(Transwell)组；IL-10拮抗(Anti-IL-10)组。培养72 h后，流式细胞术检测CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋的百分比，酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测细胞培养上清液中IL-10蛋白水平。

结果

与未刺激的B细胞相比，B细胞经刺激后IL-10 mRNA水平显著增加，差异具有统计学意义(t＝3.130，P<0.05)；流式结果显示，Co-culture组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋的百分比较Control组、Transwell组显著增加，差异具有统计学意义(q值分别为2.338，5.650，P值均<0.05)，Transwell组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋的百分比明显高于Anti-IL-10组(q＝15.091，P<0.05)；Co-culture组细胞培养上清液中IL-10的蛋白水平明显高于其他三组，差异具有统计学意义(q值分别为10.870，5.193，10.170，P值均<0.05)。此外，Anti-IL-10组培养上清液中IL-10的蛋白水平与Transwell组比较差异具有统计学意义(q＝4.978，P<0.05)。

结论

B细胞通过分泌IL-10诱导CD4^＋T细胞向Tregs细胞转化，并且细胞间接触起到协同效应。