【摘 要】
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Caco-2细胞模型可用于预测各种途径的食品营养物质吸收,被普遍用于营养物质开发的早期快速筛选过程中。传统Caco-2单层细胞模型的建立通常需要培养21 d,本研究建立一种快速培
【基金项目】
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公益性行业(农业)科研专项(201303084);现代农业产业技术体系(CARS-41-K23)资助项目
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Caco-2细胞模型可用于预测各种途径的食品营养物质吸收,被普遍用于营养物质开发的早期快速筛选过程中。传统Caco-2单层细胞模型的建立通常需要培养21 d,本研究建立一种快速培养Caco-2单细胞层的方法以缩短实验周期、降低成本。采用向标准培养基中添加生长因子的方法培养Caco-2细胞,分别研究细胞模型跨膜电阻值(TEER)、亲水标志物的渗透性、关键蛋白基因的表达、细胞膜特征形态等评价模型的完整性。表明快速培养法(9 d)获得的Caco-2模型跨膜电阻值(TEER)>220Ω·cm2;漏出标志物荧光黄表观分配系数为(0.39±0.15)×10-6 cm/s;肠腔侧(apical,AP)/基底侧(Basolateral,BL)碱性磷酸酶活力比值为5.481±0.5304,单细胞层极性分化明显;q RT-PCR检测细胞单层关键蛋白质(P-gp、MRP2)的m RNA表达量快速法同标准培养法无显著差异。此法仅需9 d即可形成完整Caco-2细胞模型。结论是向标准培养基中添加生长因子的Caco-2细胞模型快速培养法可推广。
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