pGEX-4T-1/HSV2-gG重组质粒的构建及表达

• 作 者: 成桂明 杨慧兰
• 机 构: 武警广东省总队医院,皮肤性病科,广东,广州,510507;广州军区广州总医院,皮肤性病科,广东,广州,510010
• 出 处: 中国现代医学杂志
• 发表日期: 2009年9期
• 关键词: HSV-2-gG 重组质粒 基因表达

目的 通过基因工程技术,构建含有目的 基因的重组质粒(pGEX-4T-1/HSV2-gG).方法 用PCR技术扩增HSV2-gG基因的免疫优势表位片断;将PCR产物与质粒表达载体pGEX-4T-1连接;然后鉴定含有目的 基因的重组表达载体;并转化大肠杆菌DH5α,诱导表达目的 蛋白;以免疫印迹法检测表达的目的 蛋白.结果 PCR法扩增出1 242 bp的DNA片断;通过PCR法及测序法证实重组质粒中含有1 242 bp的DNA片断.SDS-PAGE和免疫印迹法证实重组蛋白在大肠杆菌中的表达.结论 重组质粒HSV2-gG-pGEX-4T-1的成功构建及表达,为制备HSV-2血清诊断试剂奠定了基础.