【摘 要】
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本试验旨在克隆表达羊口疮病毒（ORFV）蛋白ORFV086,制备兔抗ORFV086蛋白多克隆抗体并检测ORFV086蛋白的表达。以ORFV基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增ORFV086的基因片段,将其克
【机 构】
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南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所,华南农业大学兽医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31170147、31070138）
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本试验旨在克隆表达羊口疮病毒（ORFV）蛋白ORFV086,制备兔抗ORFV086蛋白多克隆抗体并检测ORFV086蛋白的表达。以ORFV基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增ORFV086的基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-33b（＋）。将构建的pET33b-086重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）pLys感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,以纯化蛋白作为免疫原,免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体。应用ELISA和Western blotting方法对所得抗体
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